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【特別推薦】:小而密低密度脂蛋白膽固醇(sd LDL-C)測定試劑使用說明、性能指標  
發布者:idrfz.chen   
 

  (本試劑僅用于科研、實驗、技術支持,不直接應用于臨床診斷)

 

【簡介】

用于全自動生化分析儀測定小而密低密度脂蛋白膽固醇含量。

低密度脂蛋白( LDL) 是由一系列密度、體積、理化特性不同的顆粒組成,存在明顯的異質性。小而密LDL( small dense LDLsdLDL) LDL 亞組分之一,在動脈粥樣硬化( As) 發生、發展過程中起重要作用,是冠心病的危險因子。2002 年美國國家膽固醇教育計劃成人治療方案Ⅲ將sd LDL 作為冠心病新的危險因子。

【測定方法】

直接清除法

【測定原理】

第一步,試劑中的多聚體和非離子表面活性劑與sd LDL結合,選擇性地抑制sd LDL與膽固醇酶試劑反應,而膽固醇氧化酶(CO)和膽固醇酯酶(CE)與非sd LDL脂蛋白中的膽固醇反應,由于缺乏一個色源,Trinder反應不顯色。第二步,sd LDL-C與膽固醇酶試劑反應而顯色。

【試劑盒組成】

 

   

   

   

試劑

液體雙試劑

試劑Ⅰ:試劑Ⅱ=31

4-氨基安替比林、TOOS、工具酶、表面活性劑等

適量

sd LDL-C校準品

凍干1ml

sd LDL-C

見標簽

【樣本要求】

標本應空腹抽取,盡快分離血清,在冷藏(2-8)條件可穩定3天。標本如不能及時測定,應于-20保存,避免反復凍融。

【測定步驟】

1.本試劑為液體雙試劑,可直接使用。

2.測定參數:波長:546nm;光徑:10mm;溫度:37

3.測定方法:

加入物

空白管

標準管

測定管

試劑Ⅰ

300

300

300

蒸餾水(uL)

3

-

-

標準液(uL)

-

3

-

樣本(uL)

-

-

3

混勻,置37孵育5分鐘,讀取各管吸光度A1

試劑Ⅱ(uL)

100

100

100

混勻,置37保溫5分鐘,讀取各管吸光度A2,計算ΔA=A2-A1

4.上機參, 數:

 

37

血清+R1反應時間

300

樣本量

3uL

546nm

試劑Ⅰ

300uL

660nm

試劑Ⅱ

100uL

血清+R1+R2反應時間

300

5.計算:

sd LDL-C含量 mmol/L =  [(ΔA標本-ΔA空白)/ (ΔA標準-ΔA空白)]  × 校準品值

【性能指標】

1 空白吸光度 0.05

2 線性范圍0-2.60mmol/L

3 批內/分析內精密度  CV5%;批間相對極差 7%;

4 準確性  相對偏差不超過±10%。

5 抗干擾性  血清膽紅素<250μmol/LTG<18.2mmol/L、血紅蛋白<5.0g/L、抗壞血酸<55mg/dL時,對測定無顯著影響。

6 方法對照  用本測定試劑和某進口sd LDL-C測定試劑測定100例血清sd LDL-C含量,結果顯示相關系數>0.970

【注意事項】

1、試劑變混濁或空白吸光度值>0.05時,將不能使用,應棄去;

2、建議各實驗室建立自己的正常值范圍;

3、試劑與樣本量可根據需要按比例調節;

4、請勿用嘴直接吸取試劑,避免接觸皮膚、眼睛及粘膜,一旦接觸,應即用水沖洗污染部位;

5、使用配套的校準品校準,校準周期為30天,更換試劑批號時需要重新校準。建議使用正常值和病理值生化質控血清進行室內質控,測定的控制值應在確定的限制范圍內,若控制值失控,實驗室應采取適當的糾正措施。

6、不能將R1R2混成單試劑工作液。

【參考范圍

參考值范圍:0.25-1.17mmol/L

建議各實驗室建立自己的正常參考值范圍。

【儲存條件與有效期】

未開封的試劑在2-8避光條件下可穩定14個月,置37水浴至少可穩定7天。

試劑開封后,存放在分析儀試劑倉中(2-8)的試劑在30天內性質穩定。

【參考文獻】

1. Okada, M., H. Mitsui, Y. Ito, A. Fujiwara, and K. Inano. 1998. Lowdensity lipoprotein cholesterol can be chemically measured: a new superior method. J. Lab. Clin. Med. 132: 195–201.

2. Sakaue, T., T. Hirano, G. Yoshino, K. Sakai, H. Takeuchi, and M. Adachi. 2000. Reaction of direct LDL-cholesterol assays with pure LDL fraction and IDL: comparison of three homogenous methods. Clin. Chim. Acta. 295: 97–106.

3. Nichols, A. V., R. M. Krauss, and T. A. Musliner. 1986. Nondenaturing polyacrylamide gradient gel electrophoresis. Methods Enzymol. 128: 417–433.

4. McNamara, J. R., D. M. Small, Z. Li, and E. J. Schaefer. 1996. Differences in LDL subspecies involve alterations in lipid composition and conformational changes in apolipoprotein B. J. Lipid Res. 37: 1924–1935.

 

 

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